奧林巴斯顯微鏡的正確使用方法
更新時(shí)間：2014-09-01 點(diǎn)擊次數(shù)：582
首先是隨即選擇的熒光標(biāo)本出現(xiàn)在Specimen Image窗口，奧林巴斯顯微鏡同時(shí)紫外-藍(lán)光-綠光的三帶通激發(fā)光濾光片組合(DAPI-FITC-TRITC)的光譜特征顯示在“濾光片組合”(Filter Set Spectral Profiles)欄下。通過(guò)選擇在“光譜交叉部分”(Spectral Cross Sections)下合適的check box(Absorption或Emission)，熒光的吸收和發(fā)射光譜交叉的部分(濾光片投射帶通的重疊部分)就可以單一或者一起觀察了。當(dāng)一個(gè)或者多個(gè)check box被激活時(shí)，組合的濾光片傳送和發(fā)射光譜會(huì)附加在用于標(biāo)本熒光觀察的吸收和發(fā)射光譜(不包括自發(fā)熒光的植物標(biāo)本)上。熒光吸收光譜在輔助區(qū)時(shí)用褐色填充的，而在相應(yīng)的發(fā)射光光譜區(qū)用灰色填充的。濾光片組合的波長(zhǎng)特征以較低的位置展示在黑色的長(zhǎng)方形box內(nèi)。這些數(shù)值常常根據(jù)滑塊從左到右轉(zhuǎn)換而更新。
為了操作這個(gè)輔助部分，使用Filter Set滑塊可以將三帶寬激發(fā)的兩個(gè)濾光片組合相互轉(zhuǎn)換。因?yàn)榛瑝K是由左至右滑動(dòng)的，所以激發(fā)光和阻擋濾光片以及多色反光鏡的光譜會(huì)同時(shí)轉(zhuǎn)換。值得注意的是，持續(xù)轉(zhuǎn)換光譜并不意味著任何的濾光片組合都是可能的，也不意味單一的濾光片組合的光譜可以隨意改變。奧林巴斯顯微鏡在選擇的濾光片組合中改變光譜范圍很簡(jiǎn)單，有助于在每一個(gè)光學(xué)模塊中的濾光片組合建立。
單一的濾光光譜(激發(fā)光，發(fā)射光和多色反光鏡)可以通過(guò)選擇和去除Filter Set Spectral Profiles下相應(yīng)的check box來(lái)添加和刪除。除此之外，奧林巴斯顯微鏡熒光的吸收和發(fā)射光譜可以通過(guò)同樣的操作添加和刪除(Spectral Cross Sections)。觀察樣本的圖像會(huì)隨著濾光片的轉(zhuǎn)換而改變，反應(yīng)出信號(hào)強(qiáng)度和對(duì)比度的變化;而這種變化是由滑塊移動(dòng)引起濾光片組合產(chǎn)生的。一個(gè)新的目標(biāo)樣本可以通過(guò)Choose A Specimen的下拉菜單隨時(shí)進(jìn)行，奧林巴斯顯微鏡而用于觀察的熒光種類就列在下拉菜單中。在任何情況下，樣本都經(jīng)過(guò)兩種或者多種熒光探針的染色，通過(guò)選擇的寬窄的帶通阻擋濾光片組合來(lái)觀察。
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