徠卡倒置顯微鏡由于高分辨掃描電鏡的間世，為用表面標記技術觀察細胞表面形態和區別兩類紉胞群與其表面形態相的機能提供了條件。用此技術方法可研究細胞表面抗原、受體的性質，分布及運動。

　　但由于倒置顯微鏡掃描電鏡與透射電鏡的成像原理不同，因此對免疫掃描電境術的標記物有些特殊要求。具體都有哪些要求呢?我們總結幾點如下：

　　1.清晰、容易識別的形狀。對透射電鏡的標記物要求電子致密度高，掃描電鏡的標記物電子密度不是重要問題，而形狀是識別的重要因素。

　　2.化學性質穩定，在標本處理過程中不會被損壞品制備過程中能牢固地結合。

　　3.對細胞表面的固有親合力差。

　　4.大小適宜：一般而言掃描電鏡分辨率低于透射電鏡，此外掃描電鏡標本要金屑鍍膜，這都影響樣品表面結構的分辨。因此標記物若太小、結構過于微細，就不能與樣品表面固有結構區別，但標記物過于大，又不能明確定出去面抗原位置，因此標記物大小要兼顧以上兩方面。

　　5.如果樣品以苯乙烯樹脂做為包埋劑，徠卡倒置顯微鏡再行割斷法做掃描電鏡觀察是十分方便的。因為苯乙烯聚合后，氧化丙烯及醋酸異戊酌等很容易將其溶解，多次更換溶劑便可將苯乙烯清除干凈。因此，在制做透射電鏡標本時，多做出幾個包埋膠囊樣品，待聚合后，按上述方法割斷，將割斷好的樣品放在氧化丙烯中，約2小時后便可經酷酸異戊酷置換、臨界點干燥。

　　如果徠卡倒置顯微鏡應用高分辨率掃描電鏡，雖然效果不錯，但因為對標記物的特殊要求，它也有一定的局限性。